1. 項(xiàng)目背景    

摘自《大便隱血（FOB）檢測(cè)試劑盒（膠體金免疫層析法）注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（2024年修訂版）》    

大便隱血（FOB）（亦稱大便潛血）是指消化道少量出血，紅細(xì)胞被消化破壞，糞便外觀無(wú)異常改變，肉眼和顯微鏡下均不能證實(shí)的出血。在臨床消化道惡性腫瘤早期20%的患者可出現(xiàn)隱血試驗(yàn)陽(yáng)性,晚期病人的隱血陽(yáng)性率可達(dá)到90%以上，并且可呈持續(xù)性陽(yáng)性；消化道出血，消化道潰瘍病人糞便隱血試驗(yàn)多呈間斷性陽(yáng)性；痢疾，直腸息肉、痔瘡出血等也可使糞便中出現(xiàn)較多紅細(xì)胞，導(dǎo)致隱血試驗(yàn)陽(yáng)性。因此，大便隱血檢查可作為檢測(cè)各種原因所致的消化道出血的重要檢測(cè)試驗(yàn)，是較為有效的方法，目前臨床檢查大便隱血主要有膠體金免疫層析法、化學(xué)法、彩色乳膠免疫層析及熒光免疫層析法等。

2. 測(cè)試方案及性能表現(xiàn)    

針對(duì)大便隱血（FOB）的檢測(cè)，西寶生物推出4種單克隆抗體和1種重組抗原，適合膠體金免疫層析、彩色乳膠免疫層析及熒光免疫層析平臺(tái)。具體性能如下。

（以下評(píng)估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行抗體交叉配對(duì)驗(yàn)證）。     

2.1膠體金免疫層析平臺(tái)    

2.1.1 抗體配對(duì)組合1：便隱血（FOB）單抗（貨號(hào)：EKY0069G）標(biāo)記膠體金+便隱血（FOB）單抗（貨號(hào)：EKY0069H）劃膜；    

2.1.2 便隱血（FOB）高值質(zhì)控品≥10g/L（貨號(hào)：EEI0054A）用合適的稀釋液按照理論濃度依次稀釋到200ug/mL、20ug/mL、2ug/mL、0.2ug/mL、0.02ug/mL。

2.1.3 反應(yīng)模式：10uL樣品+100uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應(yīng)時(shí)間15min-20min；

2.1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在膠體金免疫層析平臺(tái)，采用此抗體配對(duì)組合1測(cè)試便隱血（FOB）質(zhì)控品稀釋梯度均顯色，靈敏度可達(dá)0.02ug/mL。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明此抗體配對(duì)在膠體金層析平臺(tái)測(cè)試性能良好。

膠體金層析平臺(tái)測(cè)試示意圖    

2.2彩色乳膠免疫層析平臺(tái)    

2.2.1 抗體配對(duì)組合2：便隱血（FOB）單抗（貨號(hào)：EKY0069H）標(biāo)記彩色乳膠+便隱血（FOB）單抗（貨號(hào)：EKY0069G）劃膜；

2.2.2 便隱血（FOB）高值質(zhì)控品≥10g/L（貨號(hào)：EEI0054A）用合適的稀釋液按照理論濃度依次稀釋到200ug/mL、20ug/mL、2ug/mL、0.2ug/mL、0.02ug/mL。

2.2.3 反應(yīng)模式：10uL樣品+100uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應(yīng)時(shí)間15min-20min；

2.2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在彩色乳膠免疫層析平臺(tái)，采用此抗體配對(duì)組合2測(cè)試便隱血（FOB）質(zhì)控品稀釋梯度均顯色，靈敏度可達(dá)0.02ug/mL。表明此抗體配對(duì)在彩色乳膠免疫層析平臺(tái)測(cè)試性能良好。

彩色乳膠層析平臺(tái)測(cè)試示意圖    

2.3熒光免疫層析平臺(tái)    

2.3.1 抗體配對(duì)組合3：便隱血（FOB）單抗（貨號(hào)：EKY0069B）標(biāo)記熒光微球+便隱血（FOB）單抗（貨號(hào)：EKY0069C）劃膜；

2.3.2 抗體配對(duì)組合4：便隱血（FOB）單抗（貨號(hào)：EKY0069C）標(biāo)記熒光微球+便隱血（FOB）單抗（貨號(hào)：EKY0069B）劃膜；

2.3.3 便隱血（FOB）高值質(zhì)控品≥10g/L（貨號(hào)：EEI0054A）用合適的稀釋液按照理論濃度依次稀釋到200ug/mL、20ug/mL、2ug/mL、0.2ug/mL、0.02ug/mL。

2.3.4 反應(yīng)模式：10uL樣品+100uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應(yīng)時(shí)間15min-20min；

2.3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在熒光免疫層析平臺(tái)，采用此抗體配對(duì)組合3及組合4測(cè)試便隱血（FOB）質(zhì)控品稀釋梯度靈敏度可達(dá)0.02ug/mL（如表1及表2實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)所示）。表明此抗體配對(duì)在熒光免疫層析平臺(tái)測(cè)試性能良好。

表1 FOB抗體配對(duì)組合3測(cè)試數(shù)據(jù)

表2 FOB抗體配對(duì)組合4測(cè)試數(shù)據(jù)

測(cè)試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。    

3.產(chǎn)品信息